Для определения группы крови применяются стандартные эритроциты (перекрестная реакция) и стандартные сыворотки (простая реакция). При определении групповой принадлежности с помощью простой реакции в обязательном порядке используются две серии стандартных изогемагглютинирующих сывороток.
Этапы определения группы крови по системе АВ0
Лабораторное определение групповой принадлежности крови по системе АВ0 осуществляется в следующем порядке. В первую очередь, дается оценка помещению, в котором будет проводиться исследование. Температура в нем должна находиться в диапазоне 15 — 25 °С. Кроме того, помещение должно быть хорошо освещено.
В левой части планшета делается надпись 0 (I), в правой части — В (III), посередине планшета — А (II). Затем посередине верхней части планшета отмечается номер исследуемой крови или фамилия донора. Рекомендуется применение активных стандартных сывороток двух серий и трех групп (А, В, 0), при этом титр должен составлять не менее 1:32. В специальных штативах в два ряда устанавливаются сыворотки. Для каждой из сывороток используется персональная маркированная пипетка. Чтобы осуществить дополнительный контроль, применяется сыворотка группы АВ (IV).
Стандартные сыворотки наносятся на планшет в два ряда, объем материала составляет 1 — 2 капли. Сыворотка группы В (III) наносится справа, группы 0 (I) — слева, группы А (II) — в средней части планшета.
Для нанесения крови на планшет используется стеклянная палочка или пипетка. Примерно одна капля крови размещается возле каждой капли сыворотки, после чего происходит их аккуратное смешивание. Объем взятой для исследования крови должен быть в 8 — 10 раз меньше, чем объем сыворотки.
Чтобы получить выраженную и быструю агглютинацию, планшет или тарелку осторожно покачивают. Затем на плоскость нужно нанести по одной капле 0,9 % раствора натрия хлорида. Сделать это следует не ранее, чем через три минуты после начала исследования, и не позднее, чем спустя пять минут.
Через пять минут нужно выбрать наиболее освещенное место в помещении и проанализировать результаты реакции. Если не удалось получить явно выраженную агглютинацию, в смесь крови и сыворотки необходимо ввести по одной капле 0,9 % раствора NaCl. После получения результата реакции агглютинации дается заключение относительно групповой принадлежности крови по системе АВ0.
Оценка результатов реакции
- Если агглютинация отсутствует во всех 3-х каплях, это говорит о том, что кровь принадлежит к группе 0 (I): в её составе не обнаружен агглютиноген.
- Если присутствует агглютинация в каплях с сыворотками 0 (I) и А (II), можно судить о наличии в крови агглютиногена В. Это означает, что кровь относится к группе В (III).
- В случае когда кровь содержит агглютиноген А, в каплях с сыворотками 0 (I) и В (III) возникает агглютинация. Такая кровь имеет групповую принадлежность А (II).
- Присутствие агглютинации в каждой из трёх капель сыворотки и крови говорит о том, что в крови присутствуют агглютиногены А и В. Другими словами, кровь принадлежит к группе АВ (IV). Принимая во внимание тот факт, что агглютинация может произойти из-за неспецифической реакции, следует нанести на планшет стандартную сыворотку группы АВ (IV) (2 — 3 капли). Затем кровь и сыворотка аккуратно смешиваются. Полученный результат оценивается в течение пяти минут.
Исследуемую кровь необходимо отнести к группе АВ (IV), если агглютинация так и не произошла. Можно говорить о неспецифической реакции, если агглютинация возникла с сывороткой группы АВ (IV). В любом сомнительном случае, включая недостаточно четкую и слабо выраженную агглютинацию, проводится повторная проверка крови с использованием стандартных сывороток других серий.
Добавить комментарий